Ensaio baseado em luminescência para avaliar a neurotoxicidade de compostos de teste em neurônios

O crescimento de neuritos - onde os neurônios desenvolvem projeções - é crucial para a função neural e regeneração.

Para avaliar os efeitos neurotóxicos dos compostos de teste promotores de crescimento de neuritos in vitro, obtenha uma suspensão de células progenitoras neurais humanas, hNPC, em meios de diferenciação.

Semeie as células em poços de placas de vários poços revestidos com poli-L-lisina e laminina, facilitando a ligação das células ao fundo do poço e apoiando o crescimento celular. Os constituintes do meio de diferenciação promovem a diferenciação de hNPC em neurônios.

Trate um conjunto de poços com composto de teste promotor de crescimento de neuritos. Isso interage com os neurônios derivados de hNPC e pode induzir o crescimento de neuritos, sem interromper os processos metabólicos celulares e a subsequente concentração de trifosfato de adenosina, ATP - a principal fonte de energia celular.

Adicione o reagente de etapa única contendo detergentes, enzima luciferase e substrato de luciferase, luciferina e inibidores de ATPase junto com íons de magnésio e misture.

Os detergentes rompem a membrana celular, resultando em lise celular e liberação intracelular de ATP na soluç