Biossensor de efeito de campo baseado em biossensor de grafeno para detectar interações proteína-proteína

As interações proteína-proteína, IBPs, são críticas na regulação da maioria dos processos biológicos.

Para detectar PPIs usando biossensor de efeito de campo, comece com um chip de transistor de efeito de campo de grafeno. O chip compreende uma superfície de grafeno funcionalizada com carboxila como o canal semicondutor entre a fonte e os eletrodos de drenagem.

Incubar o chip com uma nova solução de carbodiimida e N-hidroxisulfosuccinimida, sulfo-NHS, em um tampão zwitteriônico. Esse tampão cria um pH adequado, permitindo que a carbodiimida e o sulfo-NHS ativem os grupos carboxila funcionalizados do chip, formando ésteres reativos à amina.

Adicione a solução de proteína alvo. As aminas primárias reagem com os ésteres reativos à amina, imobilizando as proteínas no chip por meio da formação de ligações amida. Adicione uma solução de têmpera contendo amina para bloquear ésteres reativos de amina não ligados, evitando ligações não específicas.

Insira o chip no leitor eletrônico e calibre-o com um buffer. O leitor aplica uma tensão constante entre os eletrodos. Mede-se o fluxo de corrente eléctrica resultante entre os eléctrodos na condição analito-não ligado.

Adicionar a concentração m