Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 4:16 min. • July 8th, 2025
No sistema nervoso, as interações transcelulares - interações entre moléculas específicas de adesão celular sináptica, proteínas transmembranares, em neurônios pré-sinápticos e pós-sinápticos - formam um complexo nas sinapses, mediando a sinalização trans-sináptica.
Para detectar interações transcelulares entre moléculas de adesão celular sináptica expressas em células renais embrionárias humanas por meio de um ensaio de agregação celular, comece com suspensões de células transfectadas.
Uma população de células transfectadas expressa a molécula de adesão celular pré-sináptica desejada e a proteína fluorescente verde; a outra expressa a molécula de adesão celular pós-sináptica específica e a proteína fluorescente vermelha. Duas populações de células expressando proteínas fluorescentes verdes e vermelhas também são obtidas.
Centrifugue as células. Ressuspenda as células em meios adequados suplementados com íons de cálcio. Misture as células transfectadas de ambas as populações igualmente em um tubo. Repita para as outras populações de células.
Durante a incubação, os íons de cálcio se ligam a um local específico na proteína pré-sináptica expressa em uma população de células. Isso aum
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