Biopanning baseado em biossensor de microbalança de cristal de quartzo para estudar interações proteína-medicamento

Para estudar as interações proteína-droga, comece com uma microbalança de quartzo-cristal, QCM, chip sensor compreendendo material cerâmico piezoelétrico revestido com uma fina camada de ouro atuando como um eletrodo.

Cubra o eletrodo com solução de medicamento de teste, formando uma camada uniforme.

Insira o chip do sensor no aparelho QCM. Mergulhe-o em uma cubeta contendo tampão. Aplique um campo elétrico, fazendo com que os cristais cerâmicos oscilem em uma frequência fixa com base na massa das moléculas do medicamento sobre o chip do sensor.

Adicione uma biblioteca de fagos T7 contendo uma mistura de fagos geneticamente modificados exibindo variantes de peptídeos fundidos com a proteína do capsídeo dos fagos. Os fagos que exibem um peptídeo específico se ligam a moléculas de drogas com alta afinidade e ficam imobilizados no chip do sensor. Essa panorâmica de fagos T7 aumenta a massa no chip do sensor, resultando em diminuição da oscilação do cristal ao longo do tempo.

Após o equilíbrio, transfira o chip sensor ligado ao fago para uma placa de Petri úmida. Cubra o chip com uma solução bacteriana e incuba. Os fagos infectam as bactérias e se replicam, produzindo fagos específicos