Ensaio de microarranjo de antígeno viral para detectar isotipos de anticorpos no soro contra o antígeno viral

Comece o ensaio de microarray de antígeno viral com uma lâmina de microarray de antígeno viral preparada.

O slide contém várias almofadas, cada uma com uma única matriz contendo centenas de antígenos purificados de várias cepas virais impressas em pontos dispostos em uma grade. Cada ponto contém um único tipo de antígeno adsorvido na superfície tridimensional da nitrocelulose microporosa.

Prenda a corrediça em uma câmara para facilitar o manuseio durante as etapas subsequentes. Adicione um tampão de bloqueio contendo proteínas que se ligam às superfícies restantes da lâmina para evitar a ligação não específica de anticorpos à superfície.

Incube a lâmina de microarray com soro humano diluído. Os isotipos de anticorpos no soro, específicos para os antígenos na lâmina, reconhecem e se ligam aos epítopos dos antígenos.

Remova o soro. Lave com um tampão para remover anticorpos e proteínas não ligados na lâmina.

Adicione misturas de anticorpos secundários conjugados com pontos quânticos, cada um com um ponto quântico diferente. Os anticorpos secundários específicos do isótipo ligam-se especificamente ao respectivo isotipo de anticorpos séricos ligados aos antigénios na lâmina.

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