Isolamento de Monócitos de Sangue Total por Seleção Imunomagnética Negativa

Para isolar monócitos, um tipo de glóbulo branco, do sangue total por seleção imunomagnética negativa, obtenha sangue humano tratado com anticoagulante em um tubo. Adicione uma solução de coquetel de anticorpos contendo anticorpos bloqueadores do receptor Fc e complexos de anticorpos tetraméricos biespecíficos.

Cada complexo de anticorpos compreende dois anticorpos monoclonais, com um anticorpo específico para antígenos de superfície celular nas células não monócitos, incluindo glóbulos brancos e vermelhos, e o outro anticorpo específico para dextrana.

Adicione uma solução de esferas magnéticas revestidas com dextrano. Incubar. O anticorpo bloqueador do receptor Fc se liga ao receptor Fc dos monócitos, impedindo a ligação não específica de anticorpos monoclonais.

Os anticorpos monoclonais em complexos de anticorpos reconhecem e se ligam a antígenos específicos da superfície celular nas células não monócitos, deixando os monócitos sem marcação. Os grânulos magnéticos revestidos com dextrano se ligam ao anticorpo anti-dextrano dos complexos de anticorpos, reticulando as células não monócitos com os grânulos.

Coloque o tubo em um suporte magnético. Sob a influência de um campo magnéti