Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 4:56 min. • July 8th, 2025
As células somáticas adultas podem ser geneticamente reprogramadas para obter células-tronco pluripotentes induzidas, iPSCs, que exibem estados indiferenciados e proliferativos semelhantes a células-tronco.
Para diferenciar iPSCs humanas em macrófagos - glóbulos brancos que fagocitam patógenos e detritos celulares - comece com uma placa de cultura com uma superfície adesiva não celular.
Adicione meios contendo os fatores de crescimento proteína morfogenética óssea, fator de células-tronco e fator de crescimento endotelial vascular. Semeie os iPSCs e incuba.
A superfície não adesiva impede a fixação do iPSC e mantém as células em suspensão, facilitando a agregação em corpos embrióides tridimensionais, EBs. Os fatores de crescimento iniciam a diferenciação de iPSC dentro dos EBs em células de linhagem mesodérmica.
Transfira os EBs diferenciados para um tubo de centrífuga. Permita que eles se acomodem através da gravidade. Ressuspenda os EBs em meio fresco contendo interleucina-3, IL3 e fator estimulador de colônias de macrófagos, CSF1. Coloque os EBs em uma placa de cultura de células revestida de gelatina.
A gelatina - uma proteína da matriz extracelular - facilita a ligação do EB.
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