Isolamento de linfócitos de um adesivo de Peyer de camundongo

As placas de Peyer, PPs, agregados de tecidos linfóides organizados na parede do intestino delgado, contêm células imunes, incluindo linfócitos B, linfócitos T, células dendríticas e macrófagos.

Para isolar linfócitos de PPs de camundongos, comece com um camundongo sacrificado. Incisar a parede abdominal, expondo a cavidade peritoneal. Localize o ceco. Dissecar a junção ileocecal para separar o ceco do intestino delgado.

Extirpar o mesentério e incisar o intestino delgado no duodeno para remover o intestino delgado da cavidade peritoneal. Coloque o intestino delgado em uma placa de vários poços contendo meio resfriado e enxágue para remover os detritos.

Posicione o intestino delgado com o lado mesentérico voltado para baixo e umedeça com meio para manter a hidratação do tecido. Identifique os PPs - agregados brancos multilobulados no lado antimesentérico da parede intestinal.

Extirpar cuidadosamente os PPs, excluindo o tecido intestinal circundante. Transferir para um tubo contendo meio. Incubar sob agitação constante. Esta etapa de agitação separa o muco, detritos celulares e qualquer matéria fecal dos PPs, melhorando assim a recuperação dos linfócitos PP.

Em seguida, transfira o