Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 3:03 min. • July 8th, 2025
Os adipócitos, ou células armazenadoras de gordura, são as células predominantes do tecido adiposo - que secretam adipocinas - moléculas de sinalização imunológica que regulam a resposta imune.
Para gerar adipócitos in vitro, comece com uma placa de vários poços contendo uma cultura aderente de células estromais da medula óssea de camundongos, BMSCs, - células multipotentes indiferenciadas.
Trate as células com um meio de indução de adipócitos contendo inibidores da enzima fosfodiesterase e dexametasona - um glicocorticóide sintético - para desencadear a diferenciação das células.
Os inibidores entram nas células e desativam as fosfodiesterases de nucleotídeos cíclicos, enzimas essenciais para a degradação do monofosfato de adenosina cíclico, ou cAMP. Essa inibição resulta em aumento dos níveis intracelulares de cAMP, críticos para a diferenciação celular.
A dexametasona se liga a receptores intracelulares nas BMSCs e entra no núcleo para ativar genes envolvidos na síntese e acúmulo de lipídios. Isso induz a diferenciação de BMSCs em pré-adipócitos - as células precursoras de adipócitos maduros.
Substitua o meio gasto por um meio de indução novo para manter os pré-adipócitos. Após
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