Cultura de células T ativadas de células mononucleares do sangue periférico humano

Múltiplas interações receptor-ligante de superfície celular entre células T virgens e células apresentadoras de antígenos, APCs, provocam ativação e proliferação de células T.

Os dois eventos primários neste processo envolvem o reconhecimento do antígeno expresso em APC pelo complexo receptor de células T CD3, seguido pela interação entre o ligante B7 expresso em APC e o receptor de células T CD28.

Para estudar a ativação e proliferação de células T in vitro, tomar células mononucleares do sangue periférico humano, PBMCs, suspensas em um meio de cultura adequado. Adicione esferas magnéticas revestidas com anticorpos anti-CD3 e anti-CD28 e divida as células em dois tubos cônicos.

Adicione a citocina interleucina-2, IL-2, ao primeiro tubo e a interleucina-15, IL-15, ao outro. Transfira as células para uma placa de vários poços. Incubar.

Os anticorpos anti-CD3 e anti-CD28 das esferas ligam-se ao complexo receptor de células T CD3 e ao receptor CD28 expresso nas células T, respectivamente, causando ativação e proliferação de células T.

Com a IL-2, a citocina se liga ao seu receptor na superfície das células T ativadas, levando à sua diferenciação e proliferação em células T efetoras. P