Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 5:06 min. • July 8th, 2025
Para gerar emigrantes tímicos derivados de iPSC, iTEs de células T imaturas em um sistema de cultura de órgãos tímicos 3D, tome desoxiguanosina, lobos tímicos fetais de camundongos tratados com dGUO em meios adequados.
O dGUO entra no ambiente tímico e destrói os linfócitos tímicos endógenos, evitando sua interferência com células T imaturas derivadas de iPSC durante a cocultura.
Faça uma incisão profunda no centro de cada lobo tímico. Transfira os lóbulos para uma placa de cultura fresca contendo meio suplementado com os fatores de crescimento fator de células-tronco, ligante FLT3 e interleucina-7.
Pipete o meio contendo lóbulo tímico nos poços de uma placa de cultura 3D. Adicione células T imaturas derivadas de iPSC. Incubar. As células T migram para os lobos tímicos através da incisão.
Dentro do ambiente tímico, os fatores de crescimento ligante FLT3 e IL-7 ligam-se aos seus respectivos receptores em células T imaturas, levando à ativação de fatores de transcrição e à expressão de genes específicos.
Consequentemente, as células T imaturas sofrem uma série de mudanças e adquirem características específicas, amadurecendo em células T CD8αβ+ que expressam moléculas CD8, receptores
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