Expansão ex vivo de células assassinas naturais de células mononucleares do sangue periférico

As células natural killer, NK, são grandes linfócitos granulares que eliminam tumores e infecções microbianas.

Para expansão ex vivo das células NK, tomar uma suspensão de células mononucleares do sangue periférico, PBMCs, contendo uma população heterogênea de linfócitos, incluindo células NK. Adicione células alimentadoras irradiadas - células linfoblastóides não proliferativas - que expressam interleucina 21 ligada à membrana, mIL-21, necessária para ativar e expandir as células NK.

Adicione a co-cultura em um poço de cultura especializado com uma membrana permeável a gás na parte inferior, permitindo a troca gasosa. As células se estabelecem e proliferam por um longo período sem a necessidade de passagem.

Adicione interleucina 2, IL-2 e interleucina 15, IL-15 - citocinas para proliferação de células NK. Incubar por um período adequado em condições fisiológicas.

A mIL-21 nas células alimentadoras se liga a um receptor heterodimérico específico nas células NK. IL-15 e IL-2 exógenas se ligam a seus respectivos receptores. A ligação induz diferentes vias de sinalização a jusante - ativando a expressão gênica - limitando a senescência celular e levando à proliferação prolongada de cé