Reconhecimento de marcadores CD de células assassinas induzidas por citocinas humanas por citometria de fluxo

As células assassinas induzidas por citocinas, CIK, são populações heterogêneas de células imunes geradas ex vivo a partir de culturas de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) estimuladas com citocinas específicas e anticorpos monoclonais. As células CIK compreendem populações de células, incluindo células T NK-T CD3+CD56+, células T CD3+CD56- e células NK CD3-CD56+.

Para determinar a proporção da célula CIK, comece com tubos contendo uma suspensão de célula CIK derivada de PBMC. Adicione anticorpos anti-CD3 e anti-CD56 conjugados a diferentes fluoróforos e sua mistura a tubos designados. Adicione anticorpos de controle de isotipo conjugados a fluoróforos semelhantes como anticorpos específicos em outros tubos.

Os anticorpos anti-CD3 e anti-CD56 marcados com fluorescência reconhecem e se ligam a CD3 e CD56 expressos em populações de células CIK, respectivamente. Os anticorpos de controle de isotipo não têm especificidade do antígeno alvo, facilitando medições de sinal de fundo não específicas.

Pipete as células em tubos de fundo redondo com tampas de filtro de células, que ajudam na remoção de agregados celulares. Carregue os tubos em um carrossel de citômetro de fluxo.