Isolamento seletivo de células T CD4⁺ Vδ1⁺ γδ de células mononucleares do sangue periférico humano

As células T γδ expressam receptores de células T, TCRs, compreendendo cadeias gama e delta com domínios variáveis e constantes.

As células T CD4+ Vδ1+ - uma subpopulação de células T γδ - co-expressam a cadeia variável Vδ1 e o co-receptor CD4. Essas células migram para tecidos inflamados e se transdiferenciam em células T CD4+ ou CD8+ αβ funcionalmente maduras – mediando uma resposta imune.

Para isolar as células T CD4+ Vδ1+ das células mononucleares do sangue periférico humano, PBMCs, ressuspenda as células em um tampão. Use um reagente bloqueador de Fc para bloquear os receptores Fc da superfície celular e evitar a ligação de anticorpos não específicos.

Adicione anticorpos anti-Vδ1 conjugados com o fluoróforo FITC, que se ligam aos antígenos Vδ1 das células T γδ. Incube com microesferas magnéticas acopladas a anticorpos anti-FITC, que se ligam ao corante FITC nos anticorpos ligados às células T Vδ1.

Passe a mistura através de uma coluna magnética para atrair as células T Vδ1+ ligadas ao grânulo; as células T Vδ1- permanecem não ligadas e são subsequentemente liberadas. Lave a coluna com força empurrando o buffer através dela para separar as células T Vδ1+.

Incube as células com