Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 4:02 min. • July 8th, 2025
Armadilhas extracelulares de neutrófilos, ou NETs, são estruturas semelhantes a teias de fibras de cromatina complexadas com proteínas antimicrobianas que prendem e neutralizam patógenos. Os TNEs são secretados por neutrófilos - células imunes que armazenam proteínas antimicrobianas em grânulos citoplasmáticos especializados.
Para estudar a formação de TNE in vitro, tome uma suspensão de neutrófilos isolados. Adicione acetato de miristato de forbol, ou PMA - um composto pró-inflamatório lipofílico. Coloque as células em placas e incuba.
O PMA atravessa a membrana dos neutrófilos e entra no citoplasma, onde se liga e ativa a proteína quinase C ou PKC.
A PKC ativada induz a sinalização a jusante para fosforilar componentes citoplasmáticos da NADPH oxidase - um complexo enzimático - causando sua montagem no plasma e na membrana granular. O complexo produz espécies reativas de oxigênio ou ROS.
As ROS causam a liberação de proteases e proteínas antimicrobianas dos grânulos. Proteases granulares, juntamente com enzimas de citrulinação ativadas por ROS, translocam para o núcleo.
As proteases granulares causam degradação parcial das histonas, enquanto as enzimas de citrulinação promovem a
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