Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 3:19 min. • July 8th, 2025
A gengiva, ou tecido gengival, envolve a porção cervical dos dentes e o maxilar.
O tecido gengival compreende uma camada epitélio, separada do tecido conjuntivo subjacente por uma membrana basal rica em colágeno IV. O tecido conjuntivo gengival contém uma rede de células imunes, incluindo linfócitos, mastócitos e neutrófilos que protegem a gengiva de infecções.
Para isolar a rede de células imunes gengivais, pegue blocos de dentes murinos contendo tecido gengival firmemente aderido. Trate os blocos com um coquetel enzimático - contendo colagenases tipo quatro e DNases.
As colagenases entram no tecido, degradam o colágeno-IV e rompem a membrana basal e o epitélio gengival, fazendo com que a gengiva se solte dos dentes. Enquanto isso, as DNases degradam os contaminantes do DNA. Adicione um agente quelante ao tubo; para remover cátions divalentes e evitar a agregação celular.
Transfira os blocos de dentes digeridos para uma placa de Petri contendo meio DNase. Extraia o tecido gengival dos blocos de dentes e transfira-o para um filtro de células.
Usando um êmbolo, amasse o tecido. Essa dissociação mecânica rompe a camada conjuntiva gengival, liberando as células imunes do tecido. Lave
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