Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 5:41 min. • July 8th, 2025
Macerado baço e gânglios linfáticos de camundongo em um filtro de células. Lave o filtro com um tampão adequado para coletar esplenócitos e linfócitos.
Incube as células com um coquetel de anticorpos biotinilados e microesferas magnéticas anti-biotina que se ligam às células não CD8+.
Passe a suspensão celular por uma coluna magnética. Devido à força magnética, as células não-CD8+ ligadas ao grânulo ligam-se à parede da coluna enquanto as células T CD8+ eluem para fora.
Incubar as células eluídas com células apresentadoras de antígenos artificiais, aAPCs. Estas são nanopartículas magnéticas funcionalizadas com proteína de fusão de imunoglobulina do complexo de histocompatibilidade principal carregada com antígeno, MHC-Ig e anticorpo anti-CD28.
Os MHC-Igs carregados de antígeno se ligam a receptores distintos nas células T CD8+ específicas do antígeno. Os anticorpos anti-CD28 interagem com os receptores CD28 das células T, iniciando a ativação das células T.
Coloque o tubo contendo nanopartículas magnéticas e mistura de células em um suporte magnético. As células T CD8+ ligadas a aAPC são atraídas pelo campo magnético, enquanto as células T CD8+ não específicas permanecem suspensas.
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