Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 7:01 min. • July 8th, 2025
O fator estimulador de colônias de granulócitos-macrófagos, GM-CSF, é secretado por células T auxiliares ou THGM produtoras de GM-CSF. Essas células mostram uma baixa expressão de outras citocinas específicas de células T auxiliares.
Para iniciar a diferenciação in vitro de células THGM, tome uma suspensão de células T auxiliares - isoladas do baço de camundongo - contendo células maduras ativadas por antígeno e células virgens indiferenciadas.
Adicione anticorpos marcados com fluorescência direcionados a marcadores de superfície característicos das células virgens e maduras. Execute a classificação de células ativadas por fluorescência para isolar as células T virgens.
Coloque as células em um poço revestido com anticorpos que se ligam ao complexo receptor de células T. Adicione um anticorpo que se liga ao receptor co-estimulatório. A ligação sinérgica ativa as células.
Adicione a interleucina 7 - uma citocina - induzindo a diferenciação em células THGM e a produção de GM-CSF. Adicione acetato de miristato de forbol, PMA - um composto pró-inflamatório, ionomicina - um ionóforo de cálcio e um inibidor de transporte de proteínas.
O PMA entra na célula e ativa uma proteína quinase. A
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