Efeito do anticorpo anti-C-fms na osteoclastogênese em células da medula óssea de camundongos in vitro

A osteoclastogênese é o processo pelo qual os precursores dos osteoclastos se diferenciam e se fundem para formar osteoclastos multinucleados.

Para estudar o efeito do anticorpo anti-c-fms na osteoclastogênese in vitro, pegue uma placa de cultura contendo uma suspensão de células da medula óssea de camundongo. Adicione o fator estimulador de colônias de macrófagos, M-CSF.

Em cultura, o M-CSF se liga ao seu receptor específico, c-fms, em células precursoras mieloides, ativando vias de sinalização e causando diferenciação em macrófagos da medula óssea, BMMs, que representam precursores de osteoclastos e aderem à placa.

Remova as células não aderentes. Colha os BMMs e semeie-os em poços de placas de vários poços. Suplemento com M-CSF e ativador do receptor do ligante do fator nuclear kappa-Β, RANKL.

Adicione concentrações crescentes de anticorpos anti-c-fms aos poços.

No poço de controle, o M-CSF se liga aos receptores c-fms e ativa as vias de sinalização, estimulando a expressão do receptor RANK e promovendo a sobrevivência e proliferação do BMM. O RANKL se liga aos receptores RANK, desencadeando uma cascata de sinalização e causando a diferenciação e fusão do BMM em osteoclastos.

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