Nanoinjeção viral intratorácica para estudar interações vírus-hospedeiro em moscas adultas

0 visualizações • 3:52 min. • July 8th, 2025

Tome Drosophila macho do tipo selvagem anestesiado e mutante Dicer-2 em uma placa de injeção sob um estereomicroscópio. Certifique-se de que as moscas estejam livres de qualquer bactéria simbiótica que suprima a replicação do vírus de RNA.

Inocular as moscas por via intratorácica com um nanoinjetor contendo uma suspensão de vírus de RNA de fita simples de sentido positivo.

O vírus entra na célula hospedeira por meio de endocitose mediada por receptor e se replica produzindo RNA intermediário de fita dupla. O receptor de reconhecimento de padrão do hospedeiro Dicer-2 processa o RNA viral de fita dupla em pequenos RNAs interferentes, siRNAs.

O siRNA se liga ao complexo silenciador induzido por RNA, RISC, onde sua fita complementar é removida. Os siRNAs carregados de RISC se ligam a outros RNAs virais por meio de emparelhamento de bases complementares, causando degradação do RNA viral e silenciamento de genes.

A interação Dicer-2 e RNA viral ativa cascatas de sinalização antiviral a jusante, produzindo proteínas antivirais. Essas proteínas antivirais interagem com os receptores de citocinas ligados à proteína Janus quinase, ou JAK, das células hospedeiras vizinhas, iniciando a dimeriz

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