Coloração de hematoxilina e eosina para avaliar danos no cólon na colite induzida por DSS

O sulfato de dextrano sódico, ou DSS, induz colite - uma doença inflamatória intestinal - em que a ruptura da barreira epitelial intestinal leva à inflamação.

Para avaliar o dano tecidual, pegue o tecido do cólon fixo isolado de um modelo murino de colite induzida por DSS. Mergulhe o tecido em um meio de incorporação para facilitar o corte e congele rapidamente.

Usando um criomicrótomo, obtenha uma seção de tecido fino e colete-a em uma lâmina de vidro.

Mergulhe a lâmina em uma solução contendo corante de hematoxilina oxidado ligado ao mordente - um cátion metálico - conferindo uma carga positiva ao corante. O complexo corante-mordente se liga ao DNA carregado negativamente, manchando o núcleo de roxo-avermelhado.

Mergulhe o tecido em uma solução ácido-álcool diferenciadora, removendo o corante não especificamente ligado do citoplasma e da matriz extracelular. Enxágue o tecido em um agente azulado - um meio alcalino - conferindo uma cor azul aos núcleos, aumentando o contraste.

Mergulhe a lâmina em concentrações crescentes de álcool para desidratar o tecido, aumentando a penetração da contracoloração.

Mergulhe o tecido na contracoloração - solução ácida de eosina - conferindo cor r