Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 4:12 min. • July 8th, 2025
Para estudar o impacto dos antimicrobianos nos agregados bacterianos, faça a cultura de Pseudomonas aeruginosa em um meio de crescimento que promova a formação de agregados - simulando o crescimento durante a infecção.
As bactérias modificadas expressam uma proteína fluorescente para detecção de agregados sob um microscópio de fluorescência. Imagem em três dimensões para calcular o volume dos agregados, ou a biomassa bacteriana, e visualizar o aumento da biomassa ao longo do tempo, indicando o crescimento bacteriano.
Adicione colistina - um peptídeo antimicrobiano catiônico - em uma concentração subletal que mata bactérias suscetíveis enquanto seleciona as tolerantes a antibióticos.
A colistina se liga a lipopolissacarídeos carregados negativamente, ou LPS, na membrana externa bacteriana, deslocando pontes catiônicas que estabilizam a monocamada de LPS - danificando a integridade da membrana.
A colistina entra no periplasma e se liga ao LPS na membrana celular, rompendo a membrana e resultando em lise celular. Como mecanismo de contra-ataque, mutações genéticas específicas em um subconjunto de bactérias neutralizam a carga negativa do LPS. Essa modificação inibe a interação eletros
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