Infectando moscas com suspensão bacteriana usando um nanoinjetor

Para infectar moscas, comece com uma agulha de vidro de diâmetro estreito cheia de óleo mineral.

Prenda a agulha no êmbolo do nanoinjetor com um O-ring e um espaçador para injeção precisa e controlada, garantindo danos mínimos às moscas.

Solte o óleo mineral, deixando uma pequena quantidade na agulha como barreira entre a solução bacteriana e o injetor. Carregue a agulha com a suspensão bacteriana.

Posicione uma Drosophila melanogaster anestesiada com o lado ventrolateral para cima.

Injete a agulha no abdômen anterior da mosca, perfurando a cutícula e a camada epitelial. Entregue a suspensão bacteriana na hemocele - uma cavidade corporal contendo hemolinfa - um fluido circulatório rico em nutrientes.

Dentro da hemocele, células imunes chamadas hemócitos circulam ao lado do corpo adiposo, um tecido especializado equipado com receptores de reconhecimento de padrões.

Deixar que as moscas injetadas recuperem num frasco para injetáveis contendo meio. As bactérias injetadas utilizam os nutrientes da hemolinfa e se multiplicam, aumentando a carga bacteriana e estabelecendo uma infecção sistêmica.

Os receptores das células do corpo adiposo interagem com antígenos bacterianos, desencadeando