Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 3:43 min. • July 8th, 2025
Pegue uma câmara de imagem contendo uma cultura de células epiteliais humanas carregadas com um indicador fluorescente de cálcio intracelular.
Adicione um meio de crescimento contendo íons de cálcio. Introduza Shigella, uma bactéria patogênica, e incuba.
O sistema de secreção bacteriana penetra na célula hospedeira e libera efetores de invasão. A invasão desencadeia o rearranjo da actina, formando membranas que se agitam ao redor das bactérias.
No local da invasão, a fosfolipase C, ou PLC, na membrana plasmática é ativada e os receptores de trifosfato de inositol se agrupam no retículo endoplasmático ou RE.
O PLC hidrolisa o fosfatidilinositol de membrana 4,5-bifosfato em trifosfato de inositol, ou IP3, que se acumula localmente devido à densa malha de actina.
O IP3 se liga aos receptores no RE, causando liberação de cálcio. Os indicadores de cálcio se ligam aos íons liberados e emitem fluorescência, exibindo uma resposta local de cálcio.
O IP3 se difunde lentamente através da actina, esgotando ainda mais o nível de cálcio do RE e ativando um canal de cálcio da membrana plasmática, levando ao influxo de cálcio.
A fluorescência na célula indica atraso na resposta global do cálcio.
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