Um modelo de infecção da mucosa cervical humana para estudar a patogênese do HIV em condições ex vivo

Coloque a mucosa uterina cervical em uma placa de Petri. Separe a ectocérvix e a mucosa endocérvix da submucosa. Corte a camada mucosa em explantes menores e transfira-os para um tubo cônico.

Adicione o vírus da imunodeficiência humana tipo 1 ou HIV-1 no tubo de explante. As partículas do vírus HIV-1 se aproximam da camada mucosa exposta e se ligam ao receptor CD4 e ao co-receptor CXCR4 na célula hospedeira.

Após a ligação, o envelope viral se funde com a membrana da célula hospedeira, liberando um capsídeo viral contendo RNA viral e enzima transcriptase reversa no citoplasma. Dentro do citoplasma, a transcriptase reversa converte o RNA viral em DNA complementar, ou cDNA.

O cDNA se move para o núcleo da célula hospedeira, onde a integrase incorpora o DNA viral ao genoma do hospedeiro. O DNA viral direciona a síntese de novo RNA viral e proteínas que se reúnem em novas partículas virais. Essas partículas brotam da célula hospedeira, adquirindo um envelope lipídico.

Enxágue os explantes com um tampão adequado para remover qualquer vírus não ligado. Por fim, coloque os explantes em uma esponja de gelatina em uma placa multipoços com meio adequado e incube.

A interface ar-líquido maxim