Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 3:09 min. • July 8th, 2025
Partículas semelhantes a vírus, ou VLPs, imitam a estrutura do vírus, mas não possuem material genético viral, tornando-as não virulentas. As VLPs possuem epítopos antigênicos ligados à superfície reconhecidos pelas células imunológicas, tornando-as candidatas ideais a vacinas.
Para gerar VLPs de influenza recombinantes, use vetores de expressão eucariótica.
Dois vetores contêm genes que codificam para hemaglutinina, ou HA, e neuraminidase, ou NA - proteínas estruturais do vírus influenza. O terceiro vetor contém o gene gag, que codifica as proteínas centrais do vírus da imunodeficiência humana.
Adicione um reagente de transfecção à base de lipídios catiônicos. O grupo de cabeça lipídica carregada positivamente interage com o DNA carregado negativamente, formando uma bicamada ao redor dos vetores - gerando complexos de transfecção de lipossomas.
Adicione complexos em células hospedeiras de mamíferos cultivadas adequadas para a produção de VLP e incuba. Os complexos de transfecção entram nas células por meio da endocitose - a membrana do lipossomo se funde com a membrana do endossomo para liberar os vetores no citoplasma.
Os vetores entram no núcleo, levando à expressão dos genes vi
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