Um modelo de camundongo com bolsa de ar para coleta de exsudato inflamatório induzido por lipopolissacarídeo

Coloque um camundongo anestesiado na almofada cirúrgica estéril conectada a uma unidade de respiração com um fluxo contínuo de oxigênio e um gás anestésico.

Usando um filtro, carregue a seringa com ar estéril. Prenda uma agulha na seringa e injete ar esterilizado por via subcutânea na parte de trás do mouse para criar uma bolsa de ar dentro das camadas de tecido. Monitore o mouse até a recuperação.

Re-anestesiar o mouse e administrar lipopolissacarídeo, LPS, na bolsa de ar. O LPS se liga ao receptor toll-like 4, TLR-4 nos macrófagos residentes no tecido e nas células dendríticas, ativando-os.

As células ativadas liberam vários mediadores inflamatórios, como citocinas e quimiocinas, que atraem neutrófilos e outras células imunológicas. Esses mediadores também aumentam a permeabilidade vascular dos vasos sanguíneos próximos, permitindo que células imunes e fatores solúveis entrem na bolsa de ar da corrente sanguínea.

À medida que o fluido se acumula dentro da bolsa, ele forma um exsudato composto por células inflamatórias e várias moléculas bioativas.

Eutanasiar o mouse e injetar um tampão de lavagem adequado na bolsa de ar. Colete o exsudato inflamatório em um tubo de microcentrífug