Quantificação da carga de Helicobacter pylori no estômago de um camundongo infectado

Para quantificar a colonização por Helicobacter pylori em um estômago de camundongo infectado, comece com o tecido estomacal achatado contendo as regiões do corpo e do antro, suspenso em meio nutriente para apoiar a viabilidade bacteriana.

Homogeneizar para quebrar o tecido gástrico com a camada de muco, liberando Helicobacter pylori do tecido para o meio. Realizar diluições em série do homogeneizado gástrico resultante utilizando meios.

Obtenha ágar sangue de cavalo seco, HBA, placas, divididas em vários segmentos. As placas HBA são complementadas com uma mistura de antibióticos. Transferir cada diluição homogeneizada para segmentos separados da placa e espalhá-la uniformemente.

Após a secagem, posicione as placas em posição invertida dentro de um frasco de cultura anaeróbica umidificado com misturas de gases especializadas. Incubar.

O ambiente microaerofílico fornecido pelo frasco de cultura anaeróbica em conjunto com os nutrientes HBA facilita o crescimento e a formação de colônias do Helicobacter pylori. Os antibióticos do HBA inibem o crescimento de espécies bacterianas da microbiota gástrica endógena.

Conte as colônias de Helicobacter pylori em segmentos de placa HBA que se e