Cateterismo transuretral e inoculação bacteriana para gerar um modelo de infecção do trato urinário em camundongos machos

Pegue um camundongo macho anestesiado e insira um cateter em sua genitália.

Introduza bactérias uropatogênicas na uretra. Dentro do trato urinário, a bactéria se liga à célula uroepitelial.

A interação das proteínas de superfície bacteriana com as proteínas da membrana da célula hospedeira induz o rearranjo do citoesqueleto, fazendo com que a membrana da célula hospedeira se enrole firmemente em torno da bactéria por meio de um mecanismo de zíper.

A bactéria é subsequentemente internalizada dentro de uma vesícula ligada à membrana. Dentro da vesícula, a bactéria produz monômeros de toxina α-hemolisina que se reúnem para formar um complexo de poros na membrana vesicular.

A bactéria escapa através do complexo de poros para o citoplasma da célula hospedeira, onde se replica para formar comunidades bacterianas intracelulares, ou IBCs. Os IBCs são estruturas densas, semelhantes a biofilmes, dentro das células hospedeiras, protegidas do ataque direto de células imunes presentes no espaço extracelular.

À medida que as bactérias uropatogênicas amadurecem dentro dos IBCs, elas eventualmente saem das células hospedeiras para infectar as células vizinhas, causando infecções do trato urinário.

Para inocular camundongos machos, coloque duas pinças de polegar cranial e caudalmente à genitália externa do camundongo. Retraia o prepúcio para expor totalmente a glande do pênis. Então, uma vez que o pênis esteja posicionado externamente, solte a pinça do polegar. Reposicione a pinça para estabilizar o pênis saliente perpendicular ao animal, segurando o órgão suavemente, mas esticado. Em seguida, através da pequena abertura na ponta do meato uretral, introduza cuidadosamente o cateter e guie-o suavemente para dentro do pênis usando uma pinça para manter suavemente a tensão.

Assim que o cubo do cateter encontrar a ponta do pênis, muito lentamente, dispense 50 microlitros do inóculo, mantendo a posição do pênis. Observe a qualidade da instilação de acordo com um índice de qualidade de instilação predeterminado, como o mostrado aqui. Retraia o cateter lentamente ao longo de 5 segundos para evitar vazamento do inóculo. Coloque o mouse em sua gaiola em decúbito dorsal. O animal deve começar a se recuperar 30 a 45 minutos após a administração do anestésico.