Estabelecendo culturas de órgãos vilosos e deciduais como modelos ex vivo de interface materno-fetal humana

Comece com espécimes de vilosidades placentárias e parietalis deciduais.

Disseque as vilosidades - um tecido bem vascularizado contendo colunas de células trofoblastos extravilosas, ou EVT.

Transfira as vilosidades sobre uma matriz extracelular, transwell revestida com ECM colocada em um poço de cultura de tecidos.

Pegue a próxima amostra; microdisseque a decídua - um tecido uterino ao redor do feto em desenvolvimento.

Colocar a decídua sobre outro transwell revestido com ECM.

Adicione um meio adequado aos poços de cultura de tecidos para manter a umidade, mantendo os transpoços desprovidos de meio.

Sem um meio, as colunas de células EVT secretam proteinases que clivam as proteínas da MEC.

Isso inicia a remodelação da ECM, criando espaço para as células EVT invadirem e aderirem firmemente à matriz.

Enquanto isso, as outras células das vilosidades e decíduas se ligam à ECM ativando os receptores de integrina, que se agrupam para se ligar cooperativamente à matriz.

Esses processos fortalecem a adesão célula à MEC, incorporando os tecidos com segurança.

Finalmente, adicione meios específicos do tecido aos transwells para o crescimento da cultura.

Usando a técnica estéril em uma capa d