Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 5:26 min. • July 8th, 2025
Exponha um camundongo a gotículas de aerossol contendo Mycobacterium tuberculosis.
As bactérias atingem o lúmen dos alvéolos - os minúsculos sacos de ar dentro dos pulmões - contendo macrófagos.
Os receptores de reconhecimento de padrões de macrófagos se ligam aos padrões moleculares associados ao patógeno nas bactérias, desencadeando seu engolfamento em um fagossomo.
As bactérias engolfadas secretam proteínas especializadas, que rompem a membrana do fagossomo. As bactérias escapam para o citoplasma e se reproduzem.
Pós-infecção, anestesiar o rato. Administre intraperitonealmente um substrato repórter da enzima bacteriana β-lactamase para fluorescência da enzima repórter ou imagem REF.
O substrato atinge os alvéolos pulmonares através da circulação e entra nas células infectadas.
Ele penetra na membrana externa bacteriana para atingir o espaço periplasmático contendo β-lactamase.
O substrato contém um anel β-lactâmico conectando um fluorocromo e um supressor. Devido à proximidade, a fluorescência do fluorocromo é absorvida pelo extintor.
A β-lactamase hidrolisa o anel β-lactâmico, liberando o fluoróforo e resultando em emissão de fluorescência.
Imagem da fluorescência para avaliar
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos