Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 5:28 min. • July 8th, 2025
Comece com uma cultura de células endoteliais.
Substitua o meio por meio anaeróbico. Incubar em uma câmara anaeróbica para equilíbrio de temperatura.
Adicione Porphyromonas gingivalis, uma bactéria anaeróbica patogênica, e incube brevemente.
As bactérias possuem projeções proteicas, conhecidas como fímbrias, que se ligam a moléculas de adesão específicas nas células endoteliais, facilitando a adesão bacteriana.
Essa ligação desencadeia cascatas de sinalização intracelular, resultando no rearranjo do citoesqueleto de actina e na internalização bacteriana em fagossomos.
Pós-incubação, remova a mídia. Lave com um tampão anaeróbico para remover bactérias extracelulares não aderidas.
Adicione um detergente neutro para permeabilizar as membranas das células hospedeiras e induzir a lise celular, liberando bactérias internalizadas e ligadas à superfície sem causar danos.
Diluir as bactérias que contêm lisado com meios e preparar diluições em série.
Coloque essas diluições em placas de ágar sangue. Incubar em condições anaeróbicas para permitir que Porphyromonas gingivalis prolifere e forme colônias.
Após a incubação, conte as unidades formadoras de colônias (UFCs) em cada placa para quanti
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