Avaliação de Porphyromonas gingivalis internalizadas em células endoteliais hospedeiras

Durante a infecção por Porphyromonas gingivalis, as fímbrias das bactérias anaeróbicas se ligam a receptores específicos nas células hospedeiras.

Essa ligação inicia cascatas de sinalização intracelular, resultando em rearranjo de actina e internalização bacteriana dentro dos fagossomos.

Para avaliar a sobrevivência de Porphyromonas gingivalis internalizadas dentro das células endoteliais in vitro, pegue uma placa de vários poços contendo células endoteliais aderidas a lamínulas.

Adicione a suspensão de Porphyromonas gingivalis. Incubar para facilitar a internalização bacteriana.

Remova o meio e lave usando um tampão anaeróbico para remover bactérias não internalizadas.

Adicione meios contendo antibióticos, impermeáveis às células endoteliais, para eliminar as bactérias aderidas à superfície.

Incube com um surfactante suave para lisar as células endoteliais, liberando as bactérias sem causar sua lise.

Diluir o lisado recolhido com meios. Preparar diluições seriadas do lisado.

Colocar as diluições em placas de ágar sangue. Incube em condições anaeróbicas para que Porphyromonas gingivalis cresça e forme colônias visíveis.

Conte as colônias para avaliar a capacidade de Porphyromonas g