Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 5:27 min. • July 8th, 2025
Faça uma cultura de células cancerígenas com proteínas citoplasmáticas marcadas com fluorescência.
Adicione células assassinas induzidas por citocinas ou CIK - células T efetoras com características semelhantes a células assassinas naturais - possuindo atividade antitumoral.
Os receptores do grupo 2 natural killer do membro D ou NKG2D nas células CIK se ligam a proteínas induzíveis por estresse nas células cancerígenas.
A ligação induz as células CIK a liberar toxinas de grânulos citoplasmáticos - perforinas e granzimas.
As perforinas formam poros na membrana celular cancerígena, permitindo a entrada de granzimas, que ativam as caspases, induzindo a apoptose.
Após a incubação, colha as células. Adicione um corante fluorescente de viabilidade celular de ligação a ácidos nucleicos.
O corante entra pela membrana celular danificada e se liga ao DNA, resultando em células mortas com coloração dupla.
Com uma membrana celular intacta, as células vivas são impermeáveis ao corante.
Passe as células por um citômetro de fluxo para detectar células vivas exibindo fluorescência única e células mortas com fluorescência dupla.
Crie um gráfico de dispersão para medir a porcentagem de células cance
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