Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 4:25 min. • July 8th, 2025
No microambiente do câncer, os neutrófilos ativados liberam armadilhas extracelulares de neutrófilos, ou NETs, compostas de fibras de DNA extracelulares, histonas e proteínas granulares, que desempenham um papel crucial na progressão do câncer.
Para estudar a adesão de células cancerígenas-NET in vitro, adicione a suspensão de NET a poços de placas de vários poços. Incubar para formação de monocamada NET.
Pós-incubação, remova os TNEs não aderidos.
Adicione uma solução de proteína para bloquear os locais de ligação livres nos poços.
Pipetar células cancerígenas marcadas com fluorescência sobre monocamadas NET.
Receptores de superfície específicos nas células cancerígenas interagem com os TNEs, facilitando a adesão celular.
Após a incubação, descartar os meios do poço de controlo negativo.
Adicione desoxirribonuclease para degradar NETs, desprendendo as células.
Remover as soluções do controlo negativo e testar os poços. Use tampão para remover células não aderentes.
Fixe as células cancerígenas aderentes a TNEs com formaldeído.
Usando um microscópio de fluorescência, visualize as células cancerígenas fluorescentes aderidas aos TNEs.
Os poços de teste mostram adesão significativa de
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