Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:51 min. • July 8th, 2025
Posicione um rato dentro de uma câmara desinfetada para garantir o acesso à sua cauda.
Prenda a câmara para minimizar o movimento do mouse.
Esterilize a cauda e anestesiá-la.
Usando uma tesoura cirúrgica afiada, corte uma pequena porção da ponta da cauda do rato, que contém uma rede de vasos sanguíneos.
Este procedimento de corte de cauda permite a coleta de um pequeno volume de sangue periférico.
Colete o sangue em um tubo capilar heparinizado usando a ação capilar do tubo. O tubo heparinizado ajuda a prevenir a coagulação do sangue.
Usando uma seringa de bulbo, transfira o sangue para um tubo revestido com EDTA.
Inverta o tubo para uma mistura adequada do sangue com EDTA, um anticoagulante. O EDTA se liga aos íons de cálcio no sangue, impedindo a coagulação.
Centrifugue o tubo para separar o plasma das células sanguíneas.
Recolha e transfira a camada superior contendo plasma para um novo tubo.
Armazene o tubo em temperaturas mais baixas para manter a integridade dos componentes do plasma.
Para coletar uma amostra de sangue periférico, primeiro posicione suavemente o camundongo em um limitador de pequenos animais desinfetado e prenda o tubo para minimizar os movimentos do animal.
Em seguida, esfregue a cauda com álcool isopropílico fresco, seguido da aplicação de creme anestésico tópico.
Usando uma tesoura cirúrgica muito afiada, corte cerca de 0,5 a 1 milímetro da ponta da cauda e colete aproximadamente 80 microlitros de sangue periférico em tubos capilares heparinizados.
Use uma seringa de bulbo para transferir as amostras de sangue para o tubo microtainer de potássio-EDTA marcado e inverta o tubo 20 vezes para evitar a coagulação.
Depois de centrifugar os tubos de coleta de sangue de acordo com as instruções do fabricante, colete cuidadosamente a camada de plasma e armazene as alíquotas a menos 20 graus Celsius e alíquotas o plasma para armazenamento de menos 20 graus Celsius.