Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:49 min. • July 8th, 2025
Pegue um dispositivo de filtro centrífugo de grande volume contendo membranas verticais de celulose regenerada de um tamanho de poro adequado.
Adicione tampão e centrifugue. Remova o umectante de membrana contendo fluxo.
Carregue o dispositivo com proteína filtrada de cultura bacteriana, ou CFP, abrangendo proteínas solúveis e vesículas extracelulares, ou EVs – estruturas nanométricas ligadas a lipídios contendo biomoléculas secretadas por bactérias.
Durante a centrifugação, o CFP passa tangencialmente através das membranas por meio de força centrífuga.
Biomoléculas menores que os poros da membrana passam com o fluido de cultura, enquanto as maiores, como EVs, passam pela superfície da membrana, minimizando o entupimento da membrana.
O filtro concentra o CFP em um volume mínimo do dispositivo, auxiliado por seu volume de parada para evitar a secagem da biomolécula.
Adicione tampão e centrifugue.
O tampão substitui os componentes residuais do meio, criando um ambiente isotônico para as biomoléculas de CFP e mantendo sua integridade.
Coloque o copo de concentrado sobre o copo do filtro, inverta e centrifugue. Recupere o retentado concentrado de CFP para análise posterior.
Para começa
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