Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:24 min. • July 8th, 2025
Pegue uma larva de peixe-zebra injetada com esporos de fungos no ventrículo do rombencéfalo.
Os macrófagos são recrutados para o local da injeção, formando um aglomerado apertado ao redor dos esporos.
Os esporos sofrem engolfamento fagocítico por macrófagos.
Esses esporos têm a capacidade de resistir à degradação dentro do fagossomo, permitindo que germinem em hifas e induzam a morte celular necrótica do macrófago.
As hifas possuem padrões moleculares associados a patógenos expostos, ou PAMPs, em sua superfície.
Os neutrófilos recrutados para o local da infecção reconhecem e se ligam aos PAMPs. O contato com neutrófilos desencadeia um fenótipo complexo de hiper-ramificação nas hifas, dificultando assim seu engolfamento pelos neutrófilos e facilitando a evasão imunológica.
Homogeneizar a larva, liberando os esporos e hifas viáveis do fungo. Centrifugue para remover os detritos celulares e coloque o sobrenadante em um meio de crescimento.
Após a incubação, conte as unidades formadoras de colônias fúngicas ou UFCs.
As contagens de UFC representam o número de esporos de fungos viáveis que escaparam das defesas imunológicas do hospedeiro.
Imediatamente após a injeção, transfira oito das
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