Um ensaio de opsonidade para avaliar a opsonização de bactérias encapsuladas por anticorpos anticápsula

0 visualizações • 6:34 min. • July 8th, 2025

Tome uma suspensão de Bacillus anthracis quimicamente morto e marcado com fluorescência.

A cápsula bacteriana, composta principalmente de ácido poli-gama-glutâmico, fornece proteção contra a fagocitose.

Tome soros de primatas não humanos, inativados pelo calor para destruir as proteínas do complemento. Esses soros, isolados de animais imunizados com uma vacina à base de cápsula bacteriana, contêm anticorpos anticápsula.

Adicione a suspensão bacteriana quimicamente morta aos soros. Os anticorpos se ligam especificamente às cápsulas bacterianas, facilitando a opsonização bacteriana e marcando-as para eliminação por células fagocíticas. Adicione proteínas padrão do complemento para melhorar a opsonização.

Transfira as bactérias opsonizadas para macrófagos aderentes - células fagocíticas. Incube brevemente.

Os anticorpos e proteínas do complemento na bactéria se ligam aos receptores Fc e receptores do complemento dos macrófagos, respectivamente, promovendo a adesão bacteriana.

Remova a mídia. Lave com tampão para remover bactérias não aderidas.

Fixe as células para preservar a integridade celular.

Use uma coloração fluorescente para rotular os macrófagos.

Usando um microscópio de fluor

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Avaliação de Opsonização