Avaliação da topologia imunológica de sinapses por meio de imagens de células vivas

Pegue uma placa de microscópio com tampão contendo células endoteliais humanas transfectadas e tratadas com superantígeno, com os superantígenos complexados com moléculas de MHC de classe II.

Essas células apresentadoras de antígenos artificiais co-expressam diferentes proteínas fluorescentes em suas membranas e citoplasma.

Em seguida, introduza linfócitos T, que interagem com os superantígenos nas células endoteliais por meio de receptores de células T, formando uma junção célula-célula estável, uma sinapse imunológica.

Isso desencadeia o rearranjo do citoesqueleto de linfócitos T, iniciando a disseminação celular e a extensão da actina, resultando na formação de saliências semelhantes a invadossoma, ou ILPs, enriquecidas com actina, adesão e moléculas de sinalização.

As moléculas de adesão se ligam a receptores específicos nas células endoteliais, fortalecendo a interação.

A formação de sinapses ativa as vias de sinalização dos linfócitos T, elevando os níveis de cálcio intracelular e estabilizando as ILPs.

As ILPs induzem a flexão localizada da membrana nas células endoteliais, formando anéis superficiais transitórios.

Sob um microscópio de fluorescência, analise a topologia da