Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 3:45 min. • July 8th, 2025
Pegue uma mistura de diferentes conjuntos de microesferas - ou contas de poliestireno do tamanho de mícrons.
Cada conjunto é acoplado a um antígeno exclusivo de um patógeno ambiental e é marcado exclusivamente com fluorescência.
Adicione a mistura a uma placa filtrante contendo uma membrana na parte inferior.
Introduzir saliva humana contendo anticorpos contra patógenos ambientais, que se ligam a antígenos cognatos nas microesferas.
Remova os anticorpos não ligados por vácuo. Os anticorpos ligados à microesfera são retidos devido ao pequeno tamanho dos poros da membrana.
Adicione anticorpos secundários biotinilados para se ligar aos anticorpos ligados à microesfera. Remova os anticorpos não ligados.
Adicione estreptavidina conjugada a um corante repórter fluorescente, que se liga à biotina nos anticorpos secundários.
Remova o corante não ligado, ressuspenda as microesferas e passe-as por um analisador de imunoensaio multiplex.
Um feixe de laser detecta a fluorescência da microesfera, identificando o antígeno, enquanto outro feixe detecta o sinal do repórter, confirmando um anticorpo ligado.
Anticorpos específicos do antígeno na saliva indicam exposição prévia aos patógenos correspo
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