Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 6:56 min. • July 8th, 2025
Pegue os eritrócitos infectados com Plasmodium falciparum. Rotule o DNA do parasita com um corante fluorescente para visualização do parasita.
Incube esses eritrócitos infectados por parasitas com soros de indivíduos expostos à malária. Essas células exibem antígenos do parasita em sua superfície, que se ligam a anticorpos IgG humanos adquiridos naturalmente nos soros, opsonizando as células para fagocitose.
Transfira os eritrócitos infectados por parasitas opsonizados para uma placa de vários poços revestida de proteínas contendo uma suspensão de monócitos derivados de humanos - ou células fagocíticas.
Durante a incubação, os receptores Fc-gama nos monócitos interagem com os eritrócitos opsonizados por IgG, desencadeando o engolfamento dos eritrócitos em fagossomos.
Após a incubação, centrifugue a placa para evitar novas interações celulares e interromper a fagocitose.
Descarte o sobrenadante. Tratar com solução de lise de cloreto de amónio, rompendo selectivamente os eritrócitos infetados não fagocitados sem afectar os monócitos.
Adicione tampão contendo soro para interromper o processo de lisagem. Centrifugar e rejeitar o sobrenadante que contém eritrócitos lisados.
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