Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 4:46 min. • July 8th, 2025
Adicione amostras de lágrimas humanas e um coquetel de esferas de anticorpos em uma placa de ensaio lavada.
Os anticorpos estão ligados a esferas magnéticas codificadas por cores, impregnadas com proporções variadas de fluoróforos correspondentes a assinaturas espectrais distintas, facilitando a detecção de múltiplas citocinas.
As citocinas lacrimais se ligam aos seus anticorpos de captura ligados a esferas correspondentes.
Usando uma arruela de placa magnética, assente os complexos anticorpo-grânulo. Usando tampão, remova as biomoléculas não ligadas.
Adicione anticorpos de detecção biotinilados que se ligam às citocinas ligadas.
Pipeta estreptavidina-conjugado de ficoeritrina, que se liga aos anticorpos biotinilados.
Usando a arruela de placas, remova o conteúdo do poço não ligado. Ressuspenda os complexos ligados a citocinas no fluido da bainha.
Durante a análise da amostra, o sistema fluídico transporta os complexos de esferas para o conjunto óptico.
O primeiro laser ativa os corantes internos do grânulo, com o sinal resultante identificando citocinas específicas.
O segundo laser ativa a molécula repórter ligada ao complexo de grânulos, cuja intensidade de sinal representa a con
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