Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 3:03 min. • July 8th, 2025
Comece com uma placa de vários poços contendo fluido de lavagem broncoalveolar de camundongo compreendendo uma população de células imunes corada com um corante de viabilidade fluorescente verde.
Introduzir anticorpos Fc para bloquear os receptores Fc das células imunes.
Adicione um coquetel de anticorpos marcados com fluoróforo distintos direcionados a marcadores celulares específicos. Remova os anticorpos não ligados e ressuspenda as células em um tampão.
Usando citometria de fluxo, identifique singletas de fluorescência fraca, indicando células vivas.
Iluminar células a 488 nanômetros, fazendo com que as células emitam fluorescência vermelha correlacionada com células que expressam CD11c.
Dentro da população de CD11c alto, com filtros de comprimento de onda apropriados, identifique as proteínas marcadoras celulares MHC-II em células dendríticas e SiglecF em macrófagos.
Na população CD11c baixa, a expressão de CD3 em células T e CD19 em células B permite sua identificação.
Ilumina as células a 405 nanômetros, emitindo fluorescência azul, significando os neutrófilos que expressam CD11b.
Células iluminantes a 633 nanômetros excitam fluoróforos vermelhos distantes em eosinófilos que
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