Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 6:08 min. • July 8th, 2025
Pegue uma placa de vários poços contendo micobactérias. Adicione concentrações crescentes de compostos de teste aos poços.
incubar. Dependendo da ação do composto sobre as micobactérias, ele pode inibir o crescimento de micobactérias, exibindo uma atividade bacteriostática, ou eliminar as micobactérias, demonstrando atividade bactericida.
Transferir alíquotas de poços para um ensaio de resazurina de ágar carvão, ou CARA, microplaca contendo ágar com carvão ativado para absorver o composto de ensaio, evitando efeitos de transição.
incubar. A atividade bacteriostática do composto inibe a replicação micobacteriana, enquanto a atividade bactericida reduz a viabilidade micobacteriana.
Adicione tampão, resazurina e um surfactante não iônico para dispersar a resazurina nos poços.
Nas micobactérias metabolicamente ativas, as desidrogenases reduzem a resazurina fracamente fluorescente de cor azul a uma resorufina fluorescente rosa.
Usando um leitor de microplacas, meça a fluorescência da resorufina nos poços.
Poços sem fluorescência de resorufina indicam a atividade bactericida do composto.
A intensidade de fluorescência variável entre os poços indica a carga bacteriana viva, refletindo a p
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos