Um ensaio baseado em fluxo laminar para estudar as interações entre leucócitos e células endoteliais

Comece colocando uma lâmina de vidro com uma monocamada endotelial estimulada por citocina aderente em uma câmara de fluxo.

Essas células endoteliais expressam moléculas de adesão de superfície, como selectinas, e sinais migratórios ligados ao endotélio, como quimiocinas.

Introduza leucócitos marcados com fluorescência na câmara de fluxo.

À medida que os leucócitos fluem sobre a monocamada endotelial, eles se envolvem com as células endoteliais ativadas.

As selectinas nas células endoteliais ligam-se aos seus ligantes correspondentes nos leucócitos.

As interações selectina-ligante são fracas e transitórias, permitindo que os leucócitos rolem ao longo da monocamada endotelial sob a força de um meio fluido.

O rolamento permite que os leucócitos interajam com as quimiocinas, ativando as integrinas e promovendo a parada firme dos leucócitos.

Posteriormente, os leucócitos se espalharam pela monocamada endotelial, significando seu potencial de transmigração, uma etapa crucial na resposta imune.

Este ensaio ajuda a estudar o mecanismo de adesão, desadesão e transmigração de leucócitos enquanto os perfunde sobre as células endoteliais.

Use um micromolar de coloração de ácido nucleico fluor