Ressonância plasmônica de superfície localizada para detectar secreções de proteínas de uma única célula

Comece com um chip sensor de vidro com matrizes nanoestruturadas de ouro funcionalizadas com uma monocamada automontada contendo grupos carboxila.

Prenda o chip dentro de um conjunto microfluídico e introduza um ligante, para ativar os grupos carboxila.

Adicione ligantes peptídicos, conjugando com os grupos carboxila ativados por meio de ligantes.

Trate com um tampão contendo composto desativador, desativando locais de ligação não específicos e lave com um tampão.

Concentre uma luz polarizada no chip. Usando um sistema de ressonância plasmônica de superfície localizada, obtenha uma imagem das matrizes - aparecendo como quadrados brilhantes contra um fundo escuro.

No ângulo de ressonância, os elétrons de ouro absorvem a luz. Meça a intensidade da luz refletida no ângulo correspondente, para gerar a resposta do sensor.

Introduza células de hibridoma secretoras de proteínas, que se ligam ao chip e lavam.

As células anexadas secretam proteínas que interagem com os ligantes na matriz próxima.

Essas interações alteram o ângulo e a intensidade da luz refletida, resultando em uma mudança na resposta do sensor, confirmando a atividade secretora das células.

Para limpar e regenerar a ressonâ