Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:49 min. • July 8th, 2025
Pegue a suspensão fecal de camundongo compreendendo bactérias do ácido lático, ou LAB, que produzem bacteriocina, um peptídeo antimicrobiano, e inocule em um meio de ágar macio seletivo LAB pré-aquecido.
Despeje o meio em um prato de ágar, formando a primeira camada.
Sobreponha uma segunda camada de ágar e incuba.
A primeira camada promove seletivamente o crescimento de LAB, permitindo que as moléculas de bacteriocina secretadas se difundam para fora das colônias para o meio circundante.
A segunda camada contém um meio livre de células que permite a difusão da bacteriocina e evita o crescimento de colônias de LAB na superfície.
Agora, despeje uma terceira camada de ágar contendo uma cepa sensível à bacteriocina.
As bactérias que crescem na terceira camada encontram a bacteriocina se difundindo das camadas inferiores.
A bacteriocina rompe a membrana celular de bactérias sensíveis, perturbando a homeostase celular e resultando na morte celular, visível como uma zona clara na terceira camada.
Meça o diâmetro da zona para avaliar a potência da bacteriocina.
Para contar as células bacterianas produtoras de bacteriocina em amostras fecais, transfira as células diluídas do produtor de bac
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