Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:17 min. • July 8th, 2025
Pegue uma inserção de membrana contendo uma monocamada epitelial irradiada por raios-X.
Coloque a inserção da membrana em um poço contendo células mononucleares do sangue periférico, ou PBMCs - células imunes que secretam citocinas e outras moléculas de sinalização.
Coloque a resistência elétrica transepitelial, ou eletrodos TEER, na inserção da membrana.
Aplique uma pequena corrente elétrica e meça a resistência para avaliar a permeabilidade da monocamada regulada por junções apertadas.
As junções apertadas são proteínas transmembranares ligadas ao citoesqueleto por meio de proteínas de andaime.
Juntas, essas proteínas juncionais formam uma barreira robusta entre as membranas celulares, restringindo a passagem de grandes moléculas e patógenos.
As proteínas juncionais intactas impedem o fluxo de corrente elétrica, resultando em um TEER alto, indicando permeabilidade normal da monocamada.
A exposição aos raios X reduz os níveis de proteína juncional, aumentando a permeabilidade em monocamada e diminuindo o TEER.
Além disso, moléculas de sinalização de células irradiadas ativam PBMCs co-cultivadas que liberam citocinas, desencadeando uma redução adicional nos níveis de proteína junci
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