Um ensaio de biofilme de placa de Peg para triagem de agentes antibacterianos

Pegue uma placa de microtitulação com uma tampa com suportes cilíndricos, ou pinos, revestidos com biofilmes bacterianos.

Coloque a tampa de pino revestida com biofilme nos poços da placa de microtitulação com tampão para eliminar bactérias frouxamente aderidas ou planctônicas, concentrando-se nas medições anexadas ao biofilme.

Transfira a tampa de pino revestida de biofilme lavada para uma placa de desafio com concentrações crescentes de agente antibacteriano de teste. Incubar sem agitar.

Dependendo da concentração do agente e do potencial antibacteriano, ele interrompe a atividade metabólica bacteriana e a integridade do biofilme.

Após a incubação, coloque a tampa do pino nos poços da placa contendo tampão para remover as bactérias planctônicas.

Transfira-o para poços de placas de microtitulação com um meio de recuperação de biofilme contendo resazurina, um corante fracamente fluorescente permeável às células. Incubar.

Em bactérias metabolicamente ativas, as enzimas desidrogenase reduzem a resazurina de cor azul em resorufina fluorescente de cor rosa.

A falta de conversão de resazurina indica erradicação do biofilme, enquanto a conversão em resorufina sugere a presença de células